LL37 yra vienintelis natūraliai atsirandantis katijoninis amfifilinis spiralinis peptidas žmogaus katelicidinų šeimoje ir šiuo metu yra pats klasikiniausias įrankis įgimto imuniteto, antibakterinio aktyvumo ir uždegiminės mikroaplinkos srityse. Skirtingai nuo įprastų vienos funkcijos peptidų, tai yra daugiafunkcinė reguliavimo tyrimų žaliava, turinti daug savybių, įskaitant antibakterinį aktyvumą, imuninį reguliavimą, endotoksinų neutralizavimą ir ląstelių migracijos reguliavimą.
Universiteto laboratorijose ir biomedicinos tyrimų ir plėtros komandose, su kuriomis susidūriau, LL37 beveik visuotinai naudojamas bakterinių infekcijų, uždegimo modelių, gleivinės imuniteto ir žaizdų mikroaplinkos tyrimams. Šio peptido sintezė ir gryninimas yra sudėtingas, o partijų stabilumas ir aktyvumo kitimai yra labai svarbūs. Mūsų partijoje viso proceso metu griežtai kontroliuojamas endotoksinų lygis ir grynumas, kad būtų galima atkurti eksperimentinius duomenis. Pakartojame: šis produktas skirtas tik laboratoriniams tyrimams in vitro ir yra griežtai draudžiamas bet kokiam žmonių, klinikiniam ar medicinos estetiniam naudojimui.
Pagrindinės funkcijos ir fiziniai mechanizmai:
LL-37 yra vienintelis natūraliai pasitaikantis antimikrobinis peptidas žmogaus katelicidinų šeimoje. Jį sudaro 37 aminorūgštys, jis turi teigiamą krūvį ir būdinga amfifilinė -spiralinė struktūra. Fiziškai jis panaudoja savo katijonines savybes, kad elektrostatiškai pritrauktų neigiamo krūvio komponentus ant patogeninių mikroorganizmų ląstelių membranų (pvz., lipopolisacharidus gramneigiamose bakterijose ir lipoteiko rūgštį gramteigiamose bakterijose). Vėliau jo hidrofobinis paviršius giliai įsiskverbia į hidrofobinę lipidų dvigubo sluoksnio šerdį, pakeisdamas lipidų molekulių išdėstymą ir koordinavimą. Dėl šio „kilimo“ ar „žiedo“ mechanizmo jis greitai suardo ląstelės membranos struktūrą, o tai lemia didžiulį tarpląstelinių medžiagų nutekėjimą ir sukėlėjo mirtį. Be tiesioginio baktericidinio poveikio, jis taip pat gali neutralizuoti endotoksinus, slopinti bakterijų bioplėvelių susidarymą ir turėti galingą imunomoduliacinį poveikį, chemotaktiškai pritraukdamas imunines ląsteles ir reguliuodamas uždegiminių mediatorių išsiskyrimą.
Taikomi scenarijai
Lėtinės, lėtai gyjančios žaizdos: veninės kojų opos, diabetinė pėda (išbandyta I/II fazės vietinis tepimas, minimas ropokamptido pavadinimas), mažos-koncentracijos vietinis naudojimas turi tvirčiausių tyrimų įrodymų;
Odos barjeras: dažnai pasitaiko psoriazės, rožinės ir pasikartojančio folikulito tyrimų modeliuose, tačiau dažniausiai tai yra mechaniniai / nedidelio{0}} masto tyrimai;
Burnos gleivinė, periodontitas: Žmonės, kurių seilių kiekis mažas LL-37, yra linkę į periodontitą, naudojami vietiniam skalavimui/dantenų vagos tyrimams;
Kvėpavimo / šlapimo takų gleivinės apsaugos ir su biomembrana susijusių aspektų (sąnarių protezai, kateteriai) ikiklinikinis tyrimas;
Žarnyno gleivinė: IBD, žarnyno epitelio barjeras, butirato -sukeltas endogeninis LL-37 yra pagrindiniai tyrimai.
Žodžiu, tai yra „antibakterinis taisomasis peptidas, kurį natūraliai išskiria organizmas, kad apsaugotų vartus“, o ne antibiotikų pakaitalas. Tai mokslinio-laipsnio; FDA nepatvirtino jokių LL-37 vaistų, o tie, kurie yra rinkoje, pažymėti „skirti tik moksliniams tyrimams“.
Laikymo sąlygos
Liofil{0}}džiovintas pyragas: laikyti sandariai uždarytą -20 laipsnių temperatūroje, apsaugotą nuo šviesos (geriausia su sausikliu arba azoto įdaru), stabilus 24–36 mėn.; 2–8 laipsnių temperatūroje, tinka tik trumpalaikiam-laikymui (kelias savaites). Ilgalaikis laikymas kambario temperatūroje yra lėtai veikiantis toksiškumas Met6/Met21 oksidacijai ir agregacijai. Prieš atidarydami leiskite sušilti iki kambario temperatūros, kad nesusikondensuotų ir neatskiestų.
Paruošimas: Lėtai stumkite išilgai sienelės steriliu vandeniu/0,01 % acto rūgšties tirpalu/benzilo alkoholiu, kuriame yra antibakterinio tirpalo. Nepilkite tiesiogiai miltelių, nesumaišykite ir nevėdinkite. Švelniai sukite iki skaidrumo. LL-37 linkęs kauptis neutraliame vandenyje, bet gerai tirpsta silpnai rūgštiniame vandenyje (pH 4–6). Paruoškite tirpalą 2–8 laipsnių temperatūroje, apsaugotame nuo šviesos ir suvartokite per 7–14 dienų (antibakteriniams tirpalams – iki 28 dienų). Neužšaldykite-atšildykite tirpalo, nes tai sugadins spiralę ir disulfido zoną.
Dozuodami naudokite mažos{0}}absorbcijos vamzdelius (LoBind). Įprastas polipropilenas sugers katijoninius peptidus, sukeldamas subtilų koncentracijos sumažėjimą, kurį galite klaidingai manyti, kad neteisingai apskaičiavote.
Atsargumo priemonės:
Tirpdami LL-37, niekada nenaudokite pipetės antgalio, kad stipriai pūstumėte ar čiulptumėte, taip pat nenaudokite ultragarso maišymo, nes jis lengvai susikaupia tirpale. Sujungus, jo antibakterinė ir membraną{5}ardanti veikla bus žymiai sumažinta. Be to, atlikdami ląstelių eksperimentus, būtinai tiksliai nustatykite jos koncentracijos gradientą; nepridėkite per daug iš karto, kad pamatytumėte rezultatus. Nors tai yra žmogaus kilmės peptidas, didelės koncentracijos gali būti toksiškos kai kurioms žinduolių ląstelėms. Taip pat, atlikdami antibakterinius eksperimentus, atkreipkite dėmesį į druskos jonų koncentraciją auginimo terpėje; per didelis druskos kiekis labai susilpnins jo veiklą. Galiausiai nepamirškite vesti išsamių eksperimentinių įrašų. Duomenų nukrypimų atveju galite peržiūrėti duomenis, kad patikrintumėte, ar nekilo problemų dėl ištirpinimo ar saugojimo.
Populiarus Žymos: ll37, 99 % grynumo mokslinio- laipsnio polipeptidas, cas: 154947-66-7, Kinija ll37, 99 % grynumo mokslinio tyrimo laipsnio polipeptidas, cas: 154947-66-7 gamintojai, tiekėjai, gamykla
